5.4.1. Introducción#

El objetivo 100x tiene una cualidad especial que lo hace diferente del resto: se trata de un objetivo de inmersión. Este objetivo debe ser utilizado junto con un aceite de inmersión especialmente diseñado para tal uso. ¿Puede utilizarse este objetivo sin dicho aceite de inmersión? Sí, pero la imagen resultante sería tan pobre en calidad que resultaría inusable en la mayoría de los casos.

Luego de que la luz del condensador atraviesa la muestra, ésta pasa por el aire y a continuación ingresa a la óptica del objetivo. En este pequeño lapso en que la luz pasa por el aire, los fotones que componen esta luz se dispersan un poco y se pierden —con la consiguiente disminución de la calidad de imagen—. Con el empleo del aceite de inmersión esto se evita, ya que, al ser un medio acuoso, los fotones de la luz no se dispersan y salen directamente al objetivo, logrando una imagen de mayor claridad.

En la mayoría de microscopios, el objetivo 100x es el único con capacidad de trabajar con aceite de inmersión, ya que se encuentra blindado, situación que impide el ingreso no deseado del viscoso fluido a su mecanismo interno.

5.4.2. Procedimiento#

Para llevar a cabo una correcta observación con el objetivo 100x, haga lo siguiente:

1. Partiendo del objetivo 40x, mueva el revólver al objetivo 100x y a continuación al 4x. Ahora regrese hasta antes del 100x, pero sin llegar a este último, de manera tal que el portaobjetos sea fácilmente accesible con el espacio dejado entre estos dos últimos objetivos.

2. Coloque una sola y única gota de aceite de inmersión sobre la muestra de interés. Por favor, note aquí varios puntos importantes:

   • El aceite que se emplee ha de ser uno especialmente diseñado para este uso. Evite improvisar y utilizar aceite comestible, aceite automotriz, aceite para bebé, o algún otro. La formulación química de los aceites de inmersión ha pasado por muchos años de depuración y desarrollo para lograr una sustancia adecuada para este especial propósito. Si las condiciones lo permiten, utilice el aceite de inmersión Cargille, que es el de máxima calidad en el mercado.

   • Existen varios tipos de aceites de inmersión, los cuales varían en propiedades como la viscosidad. Algunos son favorables para la observación con determinadas técnicas, como la epifluorescente, por ejemplo. El aceite de inmersión Cargille tipo A (Figura 5.1) suele ser la opción adecuada en la mayoría de los casos.

   • Tenga extremo cuidado con cambiar de objetivo una vez ha colocado la gota de aceite de inmersión en el portaobjetos. Si voluntaria o accidentalmente cambia al 40x corre el riesgo de estropear este objetivo.

   • El aceite de inmersión, por sus propiedades físicas, debe ser utilizado directamente sobre el portaobjetos —y no sobre el cubreobjetos— por lo que la muestra deberá ser previamente fijada con técnicas químicas o de calor. Por tanto, se induce que el aceite de inmersión no ha de emplearse con muestras vivas.

3. Una vez colocada la gota de aceite de inmersión, termine de mover el revólver hasta que el objetivo 100x esté completamente en uso.

4. A continuación, proceda a enfocar y pulir la calidad de la imagen siguiendo las instrucciones de la sección Cómo enfocar correctamente, puntos 13 a 16.

5. Una vez haya terminado sus observaciones, mueva el revólver entre el 100x y el 4x y retire el portaobjetos con la gota de aceite de inmersión.

6. Si ya no va a hacer más observaciones en este aumento, proceda con la limpieza del mismo; si va a continuar, repita los puntos 2 y 4 de estas instrucciones.

7. A continuación, limpie el objetivo 100x utilizando el material apropiado. No utilice agua, pues el aceite de inmersión es insoluble en esa y otras sustancias. En su lugar utilice los líquidos recomendados por el fabricante del aceite de inmersión, de los cuales usted ya verificó su posesión al principio de estas instrucciones.

8. Terminada la limpieza con el objetivo 100x, puede continuar haciendo observaciones con los otros objetivos siguiendo las instrucciones correspondientes. Si ya no va a utilizar el microscopio, siga las instrucciones del apartado Cómo guardar el microscopio.

5.4.3. Diagrama de flujo#